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技術(shù)文章
20259-9
凍存管(CryogenicVial)和離心管(CentrifugeTube)是生物實驗室中最常見的兩種管狀容器,盡管外形可能相似,但它們的設(shè)計初衷、核心功能和物理特性存在本質(zhì)區(qū)別。選擇錯誤可能導(dǎo)致實驗失敗甚至安全事故。一、凍存管和離心管的核心用途與設(shè)計目的1.離心管:主要用途:顧名思義,其核心設(shè)計是為了承受離心力。用于盛放液體樣品在高速離心機中進行分離,例如分離細胞、沉淀蛋白質(zhì)、核酸提取等。次要用途:也常作為樣品的臨時儲存、混合、分裝和微量反應(yīng)的容器。它主要用于實驗的“準備與...
20258-25
標題:細胞凋亡檢測全指南:從原理到方法選擇|附全流程避坑方案細胞凋亡檢測結(jié)果不準?本文解析早期/晚期凋亡標志物,對比流式/熒光/WB/電鏡6大技術(shù)優(yōu)劣,提供AnnexinV、JC-1、Caspase-3等核心指標操作技巧!一、凋亡檢測為什么總失???三大核心痛點1.假陽性高:壞死細胞混雜(未區(qū)分PI+/AnnexinV+)2.漏檢早期凋亡:僅檢測晚期指標(如DNA斷裂)3.方法選錯:?組織切片用流式→樣本報廢?高通量篩選用電鏡→效率崩盤二、6大檢測方法全解析(附黃金選擇策略)1...
20258-23
標題:如何選擇和使用Alzet2004泵?(操作指南與注意事項)一、如何選擇和使用Alzet2004泵1.選型確認:2004型號是小鼠的標準選擇。務(wù)必根據(jù)實驗所需時長(≤28天)和流速要求(0.25μL/h)確認。2.藥物溶液準備:使用推薦溶劑(常用生理鹽水或特定緩沖液)。確保藥物在溶劑和實驗溫度下穩(wěn)定且可溶(混懸液需均勻且顆粒足夠小)。嚴格無菌操作!避免污染導(dǎo)致動物感染或藥物失效。3.泵的灌注:使用專用填充管和提供的工具,嚴格按照說明書操作,確保完q填充無氣泡。4.植入手術(shù)...
20258-21
標題:反轉(zhuǎn)錄和逆轉(zhuǎn)錄的區(qū)別一、反轉(zhuǎn)錄(ReverseTranscription)1.定義:以RNA為模板合成DNA的過程,逆轉(zhuǎn)中心法則方向(RNA→DNA)。2.核心要素:3.催化酶:反轉(zhuǎn)錄酶(ReverseTranscriptase,RTase)4.常見來源:逆轉(zhuǎn)錄病毒(如HIV)、嗜肝DNA病毒、端粒酶5.反應(yīng)本質(zhì):RNA指導(dǎo)的DNA合成6.分子生物學(xué)實驗:RT-PCR:提取RNA→反轉(zhuǎn)錄為cDNA→PCR擴增目標基因cDNA文庫構(gòu)建:將mRNA逆轉(zhuǎn)錄為雙鏈DNA并克隆7...
20258-19
標題:T細胞激活磁珠指南:高效擴增/免疫治療核心工具|技術(shù)解析+選型攻略一、T細胞激活磁珠:免疫細胞治療革命的“發(fā)動機”在CAR-T療法、腫瘤免疫治療、疫苗開發(fā)等領(lǐng)域,T細胞的高效激活與擴增是成功的關(guān)鍵。傳統(tǒng)抗體刺激法存在激活效率低、細胞因子風(fēng)暴風(fēng)險高、操作繁瑣等痛點。解決方案:T細胞激活磁珠——通過超順磁性微球偶聯(lián)CD3/CD28抗體,模擬體內(nèi)抗原遞呈,實現(xiàn):95%T細胞活化率(遠超板包被法)擴增倍數(shù)提升5-10倍精準控制激活強度,降低細胞因子釋放綜合征(CRS)風(fēng)險二、核...
20258-18
質(zhì)粒提取濃度低?6大核心原因+解決方案+避坑指南的知識干貨,分享給每位同學(xué)~一、質(zhì)粒濃度低直接后果:實驗全線崩潰!當(dāng)質(zhì)粒濃度<50ng/μL時:1.轉(zhuǎn)化失敗率↑300%2.測序信號弱(峰圖碎裂)3.酶切/連接效率暴跌立即排查以下6大關(guān)鍵環(huán)節(jié)!二、質(zhì)粒濃度低的6大核心原因+破解方案原因1:菌體量不足(占比~35%)錯誤操作:?OD???<0.6收菌→菌數(shù)太少?離心轉(zhuǎn)速<6000g→菌體丟失解決方案:收菌標準:OD???=0.8-1.0(對數(shù)生長期)離心參數(shù):≥12,000g×2...
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